

岡田 康介
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クロマトグラム・とは?
クロマトグラムとは、分離分析の結果として得られるグラフのことです。縦軸には検出器からの信号強度が、横軸には保持時間や体積が入ります。グラフ上の“ピーク”と呼ばれる山の形が、サンプルに含まれる成分を表します。
この図を読み取ると、どの成分がいつ現れたか、そしてどのくらいの量があるかを推定できます。保持時間は条件が同じならば再現性が高く、同じ成分は同じ保持時間に現れます。
クロマトグラムの仕組み
分離の原理 は、サンプルを流れる移動相と、固定された相の間で成分が異なる速度で動くことです。これにより、同じサンプル中の成分が時間と共に別々の場所に現れ、 peaks に分離されます。
測定にはいくつかの種類があります。ガスクロマトグラフィーや液体クロマトグラフィーなどがあり、装置の違いで保持時間の長さや検出方法が変わります。検出器には UV-Vis、蛍光、質量分析などがあります。
読み方のポイント
クロマトグラムを読むときは、ピークの位置(保持時間の値)と、ピークの面積または高さを見ます。面積は成分の量とおおよそ比例しますが、正確に比較するには同じ条件での標準曲線が必要です。
読み方のコツとして、基線の安定性を確認してからピークを数えます。複数のピークがある場合、重なりがあることもあるので、適切な分離条件を選ぶことが大切です。
実例で理解する
例えばお茶の中のカフェインを測るとします。サンプルを液体クロマトグラフィーで分析すると、検出器の信号は時間とともに上昇と下降を繰り返し、カフェインに対応するピークが現れます。別の成分にもそれぞれ別のピークが現れ、全体のグラフに複数の山が並ぶことがわかります。
表で覚える基本用語
以上のポイントを覚えると、クロマトグラムを読んで成分を特定したり、量を比較したりする基礎が身につきます。
注意点として、測定条件が変わるとピークの位置や形が変わるため、他の条件での比較には標準化が必要です。初心者のうちは、教科書的な例や、標準品を用いた練習から始めると理解が深まります。クロマトグラムの同意語
- ガスクロマトグラム
- ガスクロマトグラフィーによって得られる検出信号の時間変化を表したグラフ。ピークの位置(保持時間)と面積から物質を同定・定量します。
- GCクロマトグラム
- ガスクロマトグラフィーのクロマトグラムの略称。ガスクロマトグラムと同義に使われることが多く、同じ意味で用いられます。
- 液体クロマトグラム
- 液体クロマトグラフィー(例:HPLC/UHPLC)によって得られる検出信号の時間変化を表したグラフ。保持時間とピーク面積が主要情報です。
- LCクロマトグラム
- 液体クロマトグラフィーのクロマトグラムの略称。HPLCやUHPLCで得られるデータの表示図として使われます。
- ピークプロファイル
- クロマトグラム中の各成分のピーク形状・強度を示すデータの総称。保持時間・ピーク面積・分解能を評価する際に参照されます。
- クロマトグラム図
- クロマトグラムを指す別称として使われる表現。グラフそのものを指します。
クロマトグラムの対義語・反対語
- スペクトル
- 光の波長ごとの強度を示すデータ。クロマトグラムが時間と信号の関係を描くのに対して、スペクトルは波長依存の成分特性を表します。成分を“波長の特徴”で識別する視点の対比として捉えられます。
- 質量スペクトル
- 質量分析で得られる、質量対電荷比(m/z)と相対強度の関係を示すデータ。クロマトグラムは分離と時間の変化を表すのに対して、質量スペクトルは分子の構造情報を示すデータ軸が異なる対比です。
- 未分離データ
- まだ成分が分離されていない混合物のデータ。クロマトグラムは分離後の各成分の挙動を示しますが、未分離データは分離前の状態を指す表現として用いられます。
- 総和グラフ(TICグラフ)
- 全イオンの総強度を時間で追ったグラフ。クロマトグラムの個別ピークを示すのとは異なり、全体の信号の推移を一つの指標として表します。分離の有無を対比する際の“全体視点”として使われます。
- 分光データ
- 波長依存の情報を示すデータの総称。クロマトグラムは時間依存のデータであるのに対し、分光データは波長依存のデータであり、情報軸が異なる点が対比になります。
クロマトグラムの共起語
- クロマトグラフィー
- 分析の分離手法の総称。混合物を成分ごとに分離する技術。
- カラム
- 分離を担う筒状の装置で、内部に固定相が詰まっている。
- 固定相
- カラム内で成分と相互作用する固着済みの相。分離の鍵。
- 移動相
- カラム内を流れる液体または気体。成分を運ぶ役割。
- カラム温度
- 分離条件の一つ。温度を変えると保持時間や分離が変化する。
- 流量/移動相流速
- 移動相の流れの速さ。保持時間と分離に影響。
- 保持時間
- 成分がカラムを通過するのに要する時間。ピークの位置を決める指標。
- ピーク
- 検出信号に現れる山状の特徴。成分を示す目印。
- 峰幅
- ピークの水平幅。分離のシャープさを表す。
- 面積
- ピーク下の領域の大きさ。定量の基礎となる。
- 基線
- 検出信号の背景レベル。ノイズと混同しないように基準化される。
- 基線補正
- 基線の変動を補正してピーク量を正確化する処理。
- ノイズ
- 検出信号の乱れ。小ピークの検出を難しくする要因。
- 分離/セパレーション
- 複数成分を別々に検出可能にすること。
- 分解能/分離度
- 隣接するピークを区別できる程度。
- 検出器
- ピークを検出する装置(UV、蛍光、質量分析など)。
- 信号
- 検出器から得られる測定値。
- 検出感度
- 微量成分を感知できる感度。
- スペクトル
- ピークに対応する成分の特徴情報(UVスペクトル、質量スペクトルなど)。
- 定性分析
- 成分を同定する分析目的。
- 定量分析
- 成分の濃度を測定する分析目的。
- 標準曲線
- 標準溶液の濃度と信号の関係を示す曲線。
- 標準溶液
- 既知濃度の溶液。キャリブレーションに使用。
- キャリブレーション/校正
- 信号と濃度の対応を決定する手順。
- キャリブレーション曲線
- 信号と濃度の関係を示す曲線。
- 内部標準
- 測定誤差を補正するために試料に加える参照物質。
- 内部標準法
- 内部標準を用いた定量法。
- 標準添加法/標準追加法
- 未知試料に既知量の標準を加え、濃度を求める方法。
- 未知分析
- 未知成分の同定・定量を行う分析。
- 混合物
- 複数成分を含む試料。
- 成分
- クロマトグラムで検出される個々の物質。
- 自動ピーク検出
- ソフトウェアが自動でピークを見つけ出す機能。
- ピーク検出
- ピークを検出する一般的な操作。
- 再現性
- 同条件での測定結果の一貫性。
- 応用分野
- 薬物分析・食品分析・環境分析など、クロマトグラムが活用される分野。
- MS連携/質量分析連携
- 質量分析計と組み合わせて同定・定量を行う検出法。
- GC/ガスクロマトグラフィー
- 気体状試料を分離するクロマトグラフィーの一つ。
- LC/液体クロマトグラフィー
- 液体試料を分離するクロマトグラフィーの総称。
- HPLC/高速液体クロマトグラフィー
- 高効率・高速で分離する LC の一形態。
- TLC/薄層クロマトグラフィー
- 薄い層状の支持体で分離する簡易法。
- 実験条件
- 溶媒系、温度、流量など分離条件全般。
クロマトグラムの関連用語
- クロマトグラム
- 検出器が出力する信号を時間の経過で表したグラフ。横軸は保持時間、縦軸は検出信号の強さで、各ピークが成分に対応します。
- クロマトグラフィー
- 成分を分離して識別・定量する分析法の総称。様々な試料の複数成分を同時に分離できます。
- カラム
- 分離を行う管状の部品。内部には固定相が詰まっており、移動相と相互作用して成分を分離します。
- 固定相
- カラム内で成分と相互作用する固着した相。分離の強さを決める重要な要素です。
- 移動相
- カラム内を成分とともに運ぶ液体やガス。固定相との相互作用の違いで分離が起こります。
- 保持時間
- 特定の成分が検出されるまでの時間。再現性が高いほど分析結果の信頼性が上がります。
- ピーク
- 検出信号が山の形になる部分。1つの成分に対応します。
- 面積
- ピークの下にある面積のこと。定量の基本指標として使われます。
- 高さ
- ピークの最高点の値。定量には面積が主に使われますが補助指標としても用いられます。
- 面積比
- 未知試料中の成分比を決める際に用いる比率。標準物質との比較で求めます。
- 分離度
- 2つ以上の成分がピークとして別々に現れる程度。高いほど分離が良いことを示します。
- 等度条件
- 移動相を一定の組成で保持する条件。シンプルな分離に適しています。
- 勾配条件
- 移動相の組成を時間とともに変化させる条件。複雑な混合物の分離に有効です。
- カラム温度
- カラムの温度設定。温度は分離の速度や再現性に影響します。
- ガスクロマトグラフィー
- 移動相が気体のクロマトグラフィー。揮発性成分の分離に適しています。
- 液体クロマトグラフィー
- 移動相が液体のクロマトグラフィー。非揮発性・有機溶媒系の成分にも対応します。
- HPLC
- 高速液体クロマトグラフィー。高圧で速く分離するタイプのLCの代表です。
- UHPLC
- 超高圧液体クロマトグラフィー。より高圧・高速で高分離能を実現します。
- 逆相クロマトグラフィー
- 固定相が非極性、移動相が極性寄りの溶媒になる分離法。代表的akoはC18カラムです。
- 正相クロマトグラフィー
- 固定相が極性、移動相が非極性の組み合わせで分離します。
- 検出器
- クロマトグラフのピークを検出し信号に変換する装置の総称です。
- UV-Vis検出器
- 紫外・可視光の吸収を測定して成分を検出します。広く用いられる検出法です。
- 蛍光検出器
- 蛍光を発する成分を検出します。感度が高く特定の化合物に適しています。
- 電気化学検出器
- 酸化還元反応を利用して信号を検出する検出器です。特定の機能基を持つ化合物に敏感です。
- 質量分析計
- ピーク成分の分子量・構造情報を得るための検出器。定性・定量の両方に使われます。
- GC-MS
- ガスクロマトグラフィーと質量分析計を組み合わせた手法。揮発性成分の同定・定量に強力です。
- LC-MS
- 液体クロマトグラフィーと質量分析計を組み合わせた手法。生体試料など非揮発性成分の分析に適しています。
- 内標準
- 分析の正確性を上げるため、試料に一定量添加する既知成分。定量の補正に用います。
- 標準曲線
- 既知濃度の標準溶液を測定して、濃度と検出応答の関係を表すグラフ。定量の基準になります。
- 定量
- 信号(ピーク面積・高さ)から成分の量を求めること。
- 定性
- 保持時間やスペクトル情報を用いて成分を同定すること。
- ベースライン
- 検出器の基準信号。ノイズや漂移を含む底線レベルのこと。
- ノイズ
- 検出信号の背景的な揺れや雑音のこと。定量精度に影響します。
- ベースライン補正
- ベースラインの変動を補正してピークを正確に抽出する処理です。
- 流量
- 移動相の流れる速さ。分離速度と保持時間に直結します。
- 移動相組成
- 移動相を構成する溶媒の割合。等度・勾配条件の基本要素です。
- カラム寿命
- 長期間の使用により分離能が低下する現象。適切なメンテナンスが必要です。
クロマトグラムのおすすめ参考サイト
- クロマトとは? わかりやすく解説 - Weblio辞書
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- クロマトグラフィーとは?原理について解説 - Learning at the Bench
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